快速從血液中提取微生物DNA
ജ從血液中分離微生物是臨床微生物學中的一項基本實踐,能夠識別對患者護理至關重要的病原體。根據微生物負荷和目標,采用各種方法,包括血瓊脂、離心、直接分離
🅘和親和拉取。然而,傳統的從血樣中提取微生物DNA面臨著低微生物濃度、污染風險、人類DNA占主導地位、細胞壁多樣性、抑制性物質和多樣化病原體等挑戰。這些復
♑雜性要求根據特定病原體特征量身定制精確的方法。一些方法涉及較長的處理時間(如微生物培養)、復雜的程序(過濾)或對極低微生物負荷(1-10 CFU/mL血液)的
敏感性有限。
𒐪細菌在血液中的最低菌落形成單位(CFU)檢測限制因方法和目標病原體而異。例如,雙相法的檢測限為1.2 CFU/mL,DNA分離法的檢測限為10 CFU/mL,細菌DNA富
𓆉集法的檢測限也為10 CFU/mL。與傳統的血培養技術相比,這些方法提供了更高的靈敏度,后者可以檢測到每10 mL血液中的1 CFU。然而,它們可能存在與成本、復雜
性、特異性和可用性相關的限制。
🍃BcMag?簡易血液微生物DNA提取試劑盒專門設計用于高效提取血樣中的微生物DNA,同時確保沒有人類DNA的污染。這個試劑盒采用了BcMag?微生物捕捉磁珠,這
🌄些磁珠以能夠捕捉血樣中常見的各種微生物而聞名。這些微生物包括革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌、病毒和真菌,這些微生物在血樣中經常遇到。
提取過程非常簡單,包括四個主要步驟:
🥂1.除去宿主DNA:在這一初始步驟中,該試劑盒有效地去除宿主DNA,確保它不會干擾后續的微生物DNA分析。
2.磁珠捕捉:使用BcMag?微生物捕捉磁珠捕捉樣本中的所有微生物,確保全面隔離。
𒁏3.微生物裂解:然后使用試劑盒提供的通用裂解緩沖液裂解隔離的微生物。這個裂解步驟高效,避免了需要耗時的技術,如珠磨碎、堿性裂解或使用刺激性化學品,這些
方法都可能損害DNA完整性。該緩沖液溫和,并且與下游應用兼容。
📖4.上清液收集:在裂解后,清潔的微生物DNA存在于上清液中。這個上清液可以輕松吸取,其中含有沒有雜質的DNA,可以用于下游應用。
BcMag?簡易血液微生物DNA提取試劑盒的主要特點包括:
𒆙1.避免宿主DNA干擾:該試劑盒確保宿主細胞DNA不會干擾微生物DNA的分析,提高了微生物DNA分析的準確性。
2.全面的微生物捕捉:獨特的磁珠可以捕捉血樣中發現的各種微生物,提供全面和全面的提取。
♓3.高效的微生物裂解:特制的下游兼容裂解緩沖液可以高效地分解微生物細胞,消除了需要耗時和刺激性方法的需要,同時保持DNA的完整性。
ꦇ4.同時去除雜質:專有的磁珠不僅可以捕捉微生物,還可以在一步中去除PCR抑制物和細胞碎片。與傳統的DNA純化方法相比,后者涉及“結合-洗滌-洗脫”程序,這
一顯著提高了微生物檢測靈敏度的技術的關鍵優勢。
💝使用該試劑盒獲得的純化基因組DNA具有最高的完整性,可以用于微生物學研究和診斷中的各種下游應用。這個試劑盒提供了一種方便可靠的方法,可以從血樣中分離
微生物DNA,同時最大程度地減小污染風險,確保提取的DNA的質量。